豬人工授精技術(shù)操作規(guī)程

前言 
　　豬人工授精技術(shù)是養(yǎng)豬生產(chǎn)中經(jīng)濟有效的技術(shù)措施之一，其最大的優(yōu)點是減少豬群中所需公豬的總數(shù)，增加優(yōu)良公豬的利用機會。由于豬的人工授精工作不僅需要高水平的管理，而且技術(shù)要求高，從采精、檢驗、稀釋、分裝、保存、運輸及輸精是一環(huán)扣一扣，無論那一環(huán)節(jié)出了問題，都會影響到最后的受胎效果。因此，在總結(jié)過去豬人工授精技術(shù)工作的基礎(chǔ)上，制定一個統(tǒng)一的操作規(guī)程具有重大意義。 
　　本標準附錄A、附錄B、附錄C都是標準的附錄。 
　　本標準由廣西壯族自治區(qū)畜牧局提出。    
　　本標準由廣西壯族自治區(qū)畜禽品種改良站負責(zé)起草。
　　標準主要起草人：許典新、羅軍、吳石堅。 
　　本標準適用于廣西境內(nèi)各級豬場、豬人工授精站和養(yǎng)豬專業(yè)戶。適用的公豬為長白、漢普夏、杜洛克、約克夏、巴克夏和廣西地方豬品種等。其它品種豬參照執(zhí)行。 
　　1、公豬  
　　1．1  經(jīng)種豬測定站或縣以上畜牧行政主管部門審定及檢疫符合種公豬標準，發(fā)給合格證的公豬，方可作為種公豬使用。 
　　1．2  濾精量100毫升(下限)。
　　1．3  精子活率70％(下限)。 
　　1．4  精子密度中等以上。   
　　1．5  公豬使用年限10月齡(下限)至4 歲(上限)。
　　2、采精準備 
　　2．1  采精臺的制作 
　　用一個直徑為20厘米，長120厘米的園木，兩端削成弧形，安裝四條腿，在木頭上面鋪一層稻草或舊棉胎等有彈性的軟物，外面包一層軟膠皮或豬皮(亦可用鐵支焊接為半園，四條腿能活動的采精臺)。組裝后采精臺后高60厘米，前高50厘米。 
　　2．2  采精器具的消毒 
　　2．2．1  膠質(zhì)器具經(jīng)洗滌劑洗凈涼干后，隔水煮沸30分鐘(下限)。玻璃搪瓷、金屬等 器具經(jīng)洗滌劑凈涼干后和160—200℃干燥箱消毒30--60分鐘。
　　2．2．2    集精  在采精前用5％葡萄糖溶液或稀釋液沖洗一次，然后在集精杯上覆蓋四層紗布。  
　　2．2．3  采精操作者、種公豬、采精臺以及一切與精液直接接觸的器材都應(yīng)嚴格進行常規(guī)消毒處理。器材溫度均應(yīng)保持在30℃左右。 
　　3、采精 
　　3．1  采精應(yīng)在室內(nèi)進行。采精室應(yīng)清潔無塵，安靜無干擾，地面平坦不滑。
　　3．2  采精員穿戴潔凈工作衣帽，長膠鞋， 膠手套。膠手套應(yīng)先用75％酒精消毒、涼干，30分鐘后使用。
　　3．3  采精前，將公豬趕進采精預(yù)備室后，應(yīng)在40℃溫水洗凈包皮及其周圍，再用0．1％ 高錳酸鉀溶液擦洗、抹干。
　　3．4  采精方法，主要用手采法。 
　　采精時，采精員站于采精臺的右(左)后側(cè)，當公豬爬上采精臺后，采精員隨即蹲下，待公豬陰莖伸出時，用手握緊其陰莖龜頭，特別是要抓住螺旋部分，壓力不宜太大，以控制其龜頭不能轉(zhuǎn)動或回縮為限，并帶有松緊節(jié)奏，以刺激射精。當公豬充分興奮，龜頭頻頻彈彈動時，表示將要射精。公豬開始射精時多為精清，不宜收集，待射出較濃稠的乳白色精液時，應(yīng)立即以右(左)手持集精杯，放在稍離開陰莖龜頭處將射出的精液收集于集精杯內(nèi)。當射完第一次精后，刺激公豬射第二次， 繼續(xù)接收。射完精后，待公豬退下采精臺時， 采精員應(yīng)順勢用左(右)手將陰莖送人包皮中。不得粗暴推下或抽打公豬。 
　　4、精液檢查  
　　4．1  精液量、色澤、氣味、PH值   
　　公豬的射精量，一般為100—300毫升，正常精液的色澤為乳白色或灰白色，略有腥味，精液PH值為6．8—7.2。 
　　4．2  精子濃度   
　　4．2．1  精子濃度是指每毫升精液中含有精子數(shù)的多少。 
　　4．2．2  測定方法： 
　　檢查精子濃度用血球計數(shù)器計算。其方法是用白血球吸管吸取精液至刻度0．5處，再吸取3％氯化鈉溶液至刻度101處，捏住吸管的兩端充分振蕩后，將吸管前部的濾體吹棄2—3滴，然后滴一小滴于計算玻板上蓋玻片邊緣，使其自行滲入計算室內(nèi)，待液體穩(wěn)定后，在400~600倍的顯微鏡下計數(shù)。觀察計數(shù)時應(yīng)數(shù)五個有代表性的中方格(計80個小方格)內(nèi)的精子數(shù)，對頭部壓在方格四邊線上的精子，只能計算兩條邊上的。每次要做2—3 遍，求其平均值。最后將精子總數(shù)乘以 10000，就得每立方毫米精液中所含精子數(shù)，再將此數(shù)乘以1000，便得每毫升精液的精子數(shù)。
　　4．3  精子活力 
　　4．3．1  精子活力是以直線前進運動的精子占總精子數(shù)的比率來確定的。一般采取“十 級制評分法”進行評定。
　　4．3．2  精子活力測定方法：將精液滴在載玻片上，再蓋上蓋玻片，然后在35℃左右顯微鏡下放大150—200倍，仔細觀察精子活動情況。
　　4．3．3  精子活力等級評定 
　　1．0級指有100％精子呈直線式前進運動。
　　0．9級指有90％精子呈直線式前進運動。
　　0．8級指有80％精子呈直線式前進運動。
　　0．7級指有70％精子呈直線式前進運動。
　　0．6級指有60％精子呈直線式前進運動。
　　0．5級指有50％精子呈直線式前進運動。
　　4．3．4  只有60％12下精子呈直線前進運動的精液，不能用于輸精。合格的精子活力不能低于0．7級。
　　4．4  精子畸形率的檢查
　　4．4．1  檢查方法：將精液做成抹片，自然涼干，浸入95％酒精，3分鐘后，取出用清水沖洗陰干，然后用美蘭或蘭墨水染色3分鐘，用清水沖洗陰干，在400—600倍的顯微鏡下檢查。一般每次要數(shù)200個以上的精子。
　　4．4．2  精子畸形率計算公式為：
　　4．4．3  精子畸形率不能高于15％。高于15％的不能使用。
　　5、精液稀釋 
　　5．1  稀釋液用溶質(zhì)應(yīng)為試劑級(下限)。
　　5．2  稀釋液的配制
　　5．2．1  葡萄糖稀釋液 葡萄糖5克，蒸餾水100毫升。
　　5．2．2  糖一檸一卵稀釋液。
　　葡萄糖5克，檸檬酸鈉0．5克，蒸餾水 100毫升，卵黃5毫升。
　　5．2．3奶粉稀釋液   脫脂奶粉9克，蒸餾水100毫升。
　　5．2．4  “卡鋪”稀釋液
　　葡萄糖6克，檸檬酸鈉0．35克，碳酸氫 鈉0．12克，乙二胺四乙酸二鈉0.37克，蒸餾水100毫升。
　　上述各稀釋液按配方先將糖類、奶粉及檸 檬酸鈉等溶于蒸餾水中，過濾后蒸氣消毒30分鐘，取出涼至30—35℃時，加入卵黃，然 后，以每100毫升加入青霉素、鏈霉毒各5萬單位，攪拌均勻備用。 
　　5．3  精液稀釋  
　　稀釋精液時，稀釋液溫度應(yīng)與精液溫度相等。溫度應(yīng)在20℃(下限)一28℃(上限)。精液稀釋應(yīng)在無菌室內(nèi)進行，將稀釋液緩慢倒入精液中慢慢搖勻。稀釋后，每毫升精液應(yīng)含有效精子0．5億(下限)。 
　　6、精液的分裝、貯存、運輸 
　　6．1  分裝  
　　精液稀釋后，取樣檢查活力，合格者才能分裝。分裝時，用量筒按劑量量取精液倒人容器，一般每頭份20毫升。分裝完后，即將容器密封，貼上標簽。 
　　6．2  貯存 
　　精液分裝后，避光貯存，在溫度10℃－ 15℃條件下貯存。 
　　6．3  運輸 
　　用毛巾、棉花等包裹貯精容器，裝入 10℃－15℃冰壺或泡沫箱等恒溫器中運輸，防止受熱、震動和碰撞。 
　　7、輸精 
　　7．1  發(fā)情鑒定 
　　7．1．1  發(fā)情初期 
　　母豬精神不安，食欲減少或不吃，叫鳴， 外陰部微充血腫脹，四處游走、張望、喜爬其他豬，但不接受其他豬爬跨，特別在清晨表現(xiàn)更明顯。持續(xù)時間12—48小時。多數(shù)為24小時。   
　　7．1．2  發(fā)情中期 
　　母豬精神興奮接受其他豬爬跨，食欲減少或停止。外陰部充血腫脹明顯，陰道粘液光潤透明。持續(xù)時間6—36小時。 
　　7．1．3  發(fā)情后期 
　　母豬發(fā)情遲滯、喜臥，外陰部腫脹稍退， 陰道粘膜充血稍減，由深紅色變淺紅色，陰道粘液變粘稠。持續(xù)時間12—24小時。
　　7. 1．4  休情期
　　母豬精神狀態(tài)安定，食欲恢復(fù)正常。 
　　7. 2  輸精時機  
　　母豬輔精時機以發(fā)情后期為好，當按壓母豬腰尻部，母豬表現(xiàn)很安定，兩耳豎立或出現(xiàn)“靜立反應(yīng)”，此時是輸精最佳時機。如用公豬試情，一般在母豬愿意接受公豬爬跨后的4— 8小時之內(nèi)輸精為宜。 
　　7．3  輸精準備 
　　7．3．1  輸精場所應(yīng)保持安靜清潔，輸精器械必須嚴格消毒。
　　7．3．2  一次輸精數(shù)量應(yīng)按母豬的體重和精液質(zhì)量來確定。每頭每次輸精量為20—40 毫升，有效精子數(shù)10—20億。
　　7．3．3  用0．1％高錳酸鉀溶液將母豬的外陰戶消毒，再用棉花洗凈。
　　7．3．4  輸精方法 
　　輸精方法有注射法和自然法兩種。輸精時，用玻璃注射器吸取精液，再將它連接膠管(自然法直接將精液容器連接膠管)，然后把輸精膠管從母豬陰戶徐徐插進去，插到不能再插為止，動作要輕，輸精員用左(右)腳踏在母豬腰背部，左手拉住尾巴，右手持注射器，按壓注射器柄，精液便流人子宮。注射時，最好將輸精管左右輕微旋轉(zhuǎn)，用右手食指按摸陰核，增加母豬快感，刺激陰道和子宮的收縮，避免精液外流。輸完精后，把輸精管向前或左右輕輕轉(zhuǎn)動2分鐘，然后輕輕拉出輸精管。
　　7．4  輸精次數(shù) 
　　一個發(fā)情期輸精二次，第一次輸精后隔 8—12小時，再進行第二次輸精。
　　8、豬人工授精站要求 
　　應(yīng)符合附錄A(標準的附錄)的要求。
　　9、豬人工授精各項指標計算方法 
　　應(yīng)按附錄B(標準的附錄)規(guī)定計算。 
　　10、豬人工授精記錄表 
　　應(yīng)按附錄C(本標準的附錄)規(guī)定執(zhí)行。 　　附錄A
　　豬人工授精站的要求
　　A、1建站要求
　　建站要在配種范圍的中心，交通方便，易于防疫的地方。
　　A、2授精站設(shè)備
　　采(輸)精室一處，精液處理室一處，采精架一個，操作臺一張。豬舍若干間。
　　A、3器材藥品
　　表A1中規(guī)定了豬人工授精站所需的器械與藥品。
　　表A1  所需的器械與藥品

品名	單  位	數(shù)  量	品    名	單  位	數(shù)  量
溫度計	支	5	試管刷	把	5
輸精管	支	10	來蘇	m1	適量
酒精燈	個	2	酒精	ml	適量
顯微鏡	臺	l	高錳酸鉀	500	2
架盤天平	臺	1	氯化鈉	500	9
消毒柜	個	1	檸檬酸鈉	500	2
集精瓶	個	10	葡萄糖	500	2
量筒量杯	個	5	奶粉	500	適量
蒸餾器	個	1	碳酸氫鈉	500	2
載片、蓋片	片	100	乙二胺四乙酸二鈉	500	2
廣口保溫瓶	個	2	青霉毒		適量
洗臉盆	個	5	鏈霉素		適量
電冰箱	個	l	恒溫箱	個	1
注射器	支	6	白血球吸管	支	2
血球計數(shù)板	塊	2

品名	單  位	數(shù)  量	品    名	單  位	數(shù)  量
溫度計	支	5	試管刷	把	5
輸精管	支	10	來蘇	m1	適量
酒精燈	個	2	酒精	ml	適量
顯微鏡	臺	l	高錳酸鉀	500	2
架盤天平	臺	1	氯化鈉	500	9
消毒柜	個	1	檸檬酸鈉	500	2
集精瓶	個	10	葡萄糖	500	2
量筒量杯	個	5	奶粉	500	適量
蒸餾器	個	1	碳酸氫鈉	500	2
載片、蓋片	片	100	乙二胺四乙酸二鈉	500	2
廣口保溫瓶	個	2	青霉毒		適量
洗臉盆	個	5	鏈霉素		適量
電冰箱	個	l	恒溫箱	個	1
注射器	支	6	白血球吸管	支	2
血球計數(shù)板	塊	2

品名	單  位	數(shù)  量	品    名	單  位	數(shù)  量
溫度計	支	5	試管刷	把	5
輸精管	支	10	來蘇	m1	適量
酒精燈	個	2	酒精	ml	適量
顯微鏡	臺	l	高錳酸鉀	500	2
架盤天平	臺	1	氯化鈉	500	9
消毒柜	個	1	檸檬酸鈉	500	2
集精瓶	個	10	葡萄糖	500	2
量筒量杯	個	5	奶粉	500	適量
蒸餾器	個	1	碳酸氫鈉	500	2
載片、蓋片	片	100	乙二胺四乙酸二鈉	500	2
廣口保溫瓶	個	2	青霉毒		適量
洗臉盆	個	5	鏈霉素		適量
電冰箱	個	l	恒溫箱	個	1
注射器	支	6	白血球吸管	支	2
血球計數(shù)板	塊	2

  B．1  情期受胎率

   指一年內(nèi)(或配種期內(nèi))，輸精母豬情期總數(shù)中，實際受胎母豬數(shù)所占的百分率。    即：      情期受胎率 =
   X 100％  

   B．2  情期五返情率   指母豬輸精后超過30天以上，不再發(fā)情的母豬所占的百分率。即：　 情期無返情率＝
    X 100％ 

　

  B.3 總受胎率

  指一年內(nèi)（或配種期內(nèi)）輸精母豬總頭數(shù)中，受胎母豬所占的百分率。

即： 總受胎率＝
   X 100％

  B.4  每窩平均產(chǎn)仔數(shù)

        平均窩產(chǎn)仔數(shù)＝
  X 100％

  B.5  人工授精普及率

      人工授精普及率＝
  X 100％
附錄C

 C.1 種公豬采精記錄表

 表 C.1規(guī)定了種公豬采精記錄內(nèi)容

 C.2 母豬輸精記錄表

 表 C .2規(guī)定了母豬輸精記錄內(nèi)容。 

  表1                    種公豬采精記錄

　                                                                           

                                                                           表2                    母豬配種記錄表

 

品名	單  位	數(shù)  量	品    名	單  位	數(shù)  量
溫度計	支	5	試管刷	把	5
輸精管	支	10	來蘇	m1	適量
酒精燈	個	2	酒精	ml	適量
顯微鏡	臺	l	高錳酸鉀	500	2
架盤天平	臺	1	氯化鈉	500	9
消毒柜	個	1	檸檬酸鈉	500	2
集精瓶	個	10	葡萄糖	500	2
量筒量杯	個	5	奶粉	500	適量
蒸餾器	個	1	碳酸氫鈉	500	2
載片、蓋片	片	100	乙二胺四乙酸二鈉	500	2
廣口保溫瓶	個	2	青霉毒		適量
洗臉盆	個	5	鏈霉素		適量
電冰箱	個	l	恒溫箱	個	1
注射器	支	6	白血球吸管	支	2
血球計數(shù)板	塊	2